Cíl sdělení: Pilotní analytická studie použití technologie proteinových biočipů Randox Evidence Investigator pro stanovení tyreoidních hormonů a jejich srovnání s rutinně používanou metodou elektrochemiluminiscence Roche. Metodika: Při měření TSH jsme srovnávali data naměřená systémem E-170 Modular (Roche) s výsledky měření na přístroji Evidence Investigator (Randox), získanými panely Thyroid total array a Thyroid free array. Systém Evidence Investigator™ firmy Randox pracuje s technologií proteinových biočipů umožňujících současné stanovení několika analytů z jednoho vzorku. Výsledky a závěry: Použitím rozdílových Blandových-Altmanových diagramů bylo zjištěno, že oba systémy poskytují statisticky významně odlišné výsledky. Byly stanoveny intervaly spolehlivosti bias (95% CI): -1,3 až 2,7 mU/l pro TSH (total modul), -1,7 až 3,0 mU/l pro TSH (free modul), -53,9 až 54,0 nmol/l (T4), -1,11 až 0,66 nmol/l (T3), -4,7 až 3,0 pmol/l (fT4) a -1,4 až 4,2 pmol/l (fT3). Za hlavní příčinu nesouladu lze považovat nedostatečnou harmonizaci kalibrací biočipového systému s klasickými rutinními postupy., Objective: Presented is the pilot study using Randox Evidence Investigator biochip array technology in measurement of thyroid hormones in serum compared to electrochemiluminiscent immunoassay by Modular E-170 (Roche). Method: In the determination of TSH we compared data measured by system Evidence Investigator (Thyroid total panel and Thyroid free panel, Randox), with results gained on equipment Modular E-170 (Elecsys TSH, Roche). Investigator Biochip Array Technology is used to perform simultaneous quantitative detection of multiple analytes from a single patient. A combination of competitive and sandwich chemiluminiscent immunoassays is employed. Results and Conclusion: The Bland & Altman plots comparing two measurements techniques shows statistically significant differences in results. We determined bias (95% confidence interval): -1.3 to 2.7 mU/l for TSH (Thyroid total panel); -1.7 to 3.0 mU/l for TSH (Thyroid free panel); -53.9 to 54.0 nmol/l (total T4), -1.11 to 0.66 nmol/l (total T3), -4.7 to 3.0 pmol/l (free T4) and -1,4 - 4,2 pmol/l (free T3). The main reason for result differences appears to be in insufficient harmonisation of biochip and routine method calibrations., Jaroslava Vávrová, Bedřich Friedecký, Martina Ulrychová, Eva Ličbinská, Vladimír Palička, and Lit.: 3
Cíl studie: Stanovit koncentraci N-terminálního fragmentu natriuretického peptidu typu B u pacientů s neobstruktivním typem hypertrofické kardiomyopatie (HKM) a zjistit vztah k morfologickým a funkčním parametrům zjištěným echokardiograficky. Typ studie: observační. Název a sídlo pracoviště: I. interní kardioangiologická klinika LF UK a FN, Sokolská 585, Hradec Králové. Metody: Do studie bylo zařazeno 21 pacientů s HKM, u kterých bylo před zařazením do studie provedeno echokardiografické vyšetření. Byly analyzovány plazmatické hladiny N-terminálního fragmentu natriuretického peptidu typu B (NT-proBNP) a jejich vztah k ukazatelům morfologie srdečních oddílů a funkce levé komory srdeční. Výsledky: Hodnoty NT-proBNP byly v souboru pacientů významně vyšší v porovnání s kontrolní skupinou (377,7 ± 317,5 ng/l vs. 91,3 ± 76,6 ng/l, p 0,005). Analýza echokardiografických dat ukázala významnou asociaci NT-proBNP a ejekční frakce levé komory (r = -0,48, p = 0,03), frakčního zkrácení levé komory (r = -0,44, p = 0,05), a indexu masy levé komory (r = 0,52, p = 0,02). Závěry: Hypertrofická kardiomyopatie je provázena vzestupem hladiny NT-proBNP. Tento vzestup koreluje s masou levé komory a její systolickou funkcí. Stanovení těchto parametrů může mít klinický význam pro diagnostiku a stratifikaci rizika těchto pacientů., Objective: To assess plasma N-terminal pro brain natriuretic peptide (NT-proBNP) concentration in patients with nonobstructive cardiomyopathy (HCM) and try to find an association with morphological and functional echocardiographic parameters. Design of the study: observational study. Settings: 1st Department of Internal Medicine - Cardioangiology, University Hospital Hradec Králové, Czech Republic. Methods: 21 patients with HCM was enrolled into the study. Echo and catheterization were performed before enrolment into the study. We analysed plasma NT-proBNP concentrations and their association with morphological and functional parameters. Results: Compared to control group, plasma NT-proBNP was significantly increased (377.7 ± 317.5 ng/L vs. 91.3 ± 76.6 ng/L, p = 0.005). We observed significant association of NT-proBNP and left ventricular ejection fraction (r = -0.48, p = 0.03), left ventricular fractional shortening (r = -0.44, p = 0.05) and left ventricle mass index (r = 0.52, p = 0.02). Conclusions: Hypertrophic cardiomyopathy is associated with increased plasma NT-proBNP concentration. The increase of NT-proBNP is determined by left ventricle mass and systolic function. We assume that assessment of these parameters could be useful in diagnosis and risk stratification in these patients., Pudil R., Horáková L., Vašatová M., Karešová I., Fučíková A., Praus R., Palička V., and Literatura
Cíl studie: Katecholaminy a jejich metabolity jsou využívány v diagnostice feochromocytomu. Naše sdělení se zabývá validací metody na stanovení normetanefrinu (NMN) a metanefrinu (MN) v plazmě a v moči. Název a sídlo pracoviště: Ústav klinické biochemie a diagnostiky LF UK a FN v Hradci Králové. Materiál a metoda: Byla použita metoda HPLC s elektrochemickou detekcí (ED). Separační podmínky: mobilní fáze 1 mol/l NaH2PO4, 0,34 mmol/l 1-oktansulfonát sodný, 0,13 mmol/l EDTA, 75 ml/l acetonitril, analytická kolona C18 RP, průtok mobilní fáze 1 ml/min. Podmínky detekce (elektrochemický detektor ESA Coulochem II): ochranná cela s potenciálem 370 mV, analytická cela se 150 mV a -390 mV. Příprava vzorku: přídavek vnitřního standardu 4-hydroxy- -3-methoxy-benzylamoniumchloridu, izolace analytů a jejich přečištění extrakcí na pevné fázi s použitím SPE kolonek Oasis MCX, Waters (sorbent kondicionován metanolem a vodou, promýván 0,1 mol/l HCl a metanolem, eluce vzorku 5% metanolickým roztokem hydroxidu amonného). Výsledky: Průměrná opakovatelnost 7,4 % a reprodukovatelnost 8,0 %. Hodnoty výtěžnosti se pohybovaly v rozsahu 94–111 %. Ověření referenčních intervalů: NMN v plazmě 0,1–0,61 nmol/l, MN v plazmě 0,06–0,31 nmol/l, NMN v moči 0,480–2,400 µmol/24 h MN v moči 0,264–1,440 µmol/24 h. Závěry: Stanovení metanefrinů uvedenou metodou HPLC s elektrochemickou detekcí je rychlou a přesnou metodou pro stanovení metabolitů katecholaminů v plazmě a v moči., Objective: Catecholamines and their metabolites are used for diagnosis of pheochromocytoma. Our communication deals with validation of methods for determination of normetanephrine (NMN) and metanephrine (MN) in plasma and urine. Settings: Institute of Clinical Biochemistry and Diagnostics, Medical Faculty Hospital, Charles University, Hradec Kralové, Czech Republic Material and Methods: HPLC method with electrochemical detection (ED) was used. Separation conditions was as follows: mobile phase 1 mol/l NAH2PO4,0.34 mmol/l 1-octansulfonic acid sodium salt, 0.13 mmol/l EDTA, 75 ml/l acetonitrile, C18 RP analytical column, flow rate 1 ml/min. Detection conditions (electrochemical detector ESA Coulochem II): conditioning cell with potential 370 mV, analytical cell 150 and -390 mV. Sample preparation: addition of 4-hydroxy-3- -methoxy-benzylammoniumchloride as internal standard, isolation and purification were performed by solid-phase extraction (Oasis MCX, Waters). Sorbent was conditioned with methanol and water and washed by 0.1 mol/l HCl and methanol. For sample elution 5% ammonium hydroxide in methanol was used. Results: Average of repeatability 7.4% and reproducibility 8%. Recovery values ranged from 94–111%. We also calculated inter-in reference intervals. Plasma values were: 0.1–0.61 nmol/l for NMN and 0.06–0.31 nmol/l for MN. Urine values: 0.480–2.400 µmol/24 h for NMN and 0.264–1.440 µmol/24 h for MN. Conclusion: Rapid and precise method for determination of catecholamine metabolites in plasma and urine was successfully validated., Martina Ulrychová, Jaroslava Vávrová, Vladimír Palička, and Lit.: 9