Huntingtonova nemoc (HD) je neurodegenerativní porucha způsobená elongací CAG repetic v genu kódující protein huntingtin (Htt). U pacientů jsou v postižených tkáních přítomny vedle monomerní formy hlavně N‑koncové fragmenty, oligomery a polymery mutovaného huntingtinu (mtHtt), oproti tomu samotná monomerní forma mtHtt je exprimována v podstatě ve všech buňkách. Nejvíce postižené tkáně jsou bazální ganglia a mozková kůra. V této studii jsme analyzovali přítomnost N‑koncových fragmentů a oligomerů Htt v různých tkáních 24- a 36měsíčních transgenních (TgHD) miniprasat exprimujících N‑koncovou část lidského mutovaného huntingtinu a jejich zdravých sourozenců. Zjistili jsme, že mozková kůra a varlata na rozdíl od svalu a srdce TgHD miniprasat obsahují kromě monomerní formy i N‑koncové fragmenty a oligomerní smíry. Ve svalech z 36 měsíčních TgHD miniprasat však již začíná mírná fragmentace. Tato zjištění napodobují časnou progresi onemocnění u lidí, a proto miniprase poskytuje slibný model pro terapeutické testování HD. Klíčová slova: Huntingtonova nemoc – transgenní miniprasečí model – mutovaný huntingtin –proteinové fragmenty – oligomerní struktury Autoři deklarují, že v souvislosti s předmětem studie nemají žádné komerční zájmy. Redakční rada potvrzuje, že rukopis práce splnil ICMJE kritéria pro publikace zasílané do biomedicínských časopisů., Huntington’s disease (HD) is a neurodegenerative disorder caused by the the elongation of CAG triplet repeat in the gene encoding the huntingtin protein (Htt). In patients, in addition to the monomeric form of huntingtin, N‑terminal fragments, oligomers, and polymers are present mostly in the affected tissues, even though the mutated huntingtin (mtHtt) is expressed basically in all cells. The most affected tissues are basal ganglia and cerebral cortex. In this study we analyzed the presence of N‑terminal fragments and oligomers of Htt in different tissues of 24 and 36 months old experimental animals. This was done in our large animal model of HD, which uses transgenic (TgHD) minipigs expressing N‑terminal part of human mtHtt. Among all the tissues tested, we found cortex and testes to contain N‑terminal fragments as well as oligomeric smears in TgHD minipigs compared to wild type siblings. On the other hand, we did not detect any fragments or oligomers in muscle and heart of TgHD minipigs, only starting fragmentation in muscles of 36 months old animals. These findings mimic the early progression of the disease in humans, hence presents minipig as a promising model for therapeutic testing of HD., and D. Vidinska, J. Motlik, Z. Ellederova
We aimed to determine the impact of Ca2+-related disorders induced in intact animal hearts on ultrastructure of the cardiomyocytes prior to occurrence of severe arrhythmias. Three types of acute experiments were performed that are known to be accompanied by disturbances in Ca2+ handling. Langedorffperfused rat or guinea pig hearts subjected to K+-deficient perfusion to induce ventricular fibrillation (VF), burst atrial pacing to induce atrial fibrillation (AF) and open chest pig heart exposed to intramyocardial noradrenaline infusion to induce ventricular tachycardia (VT). Tissue samples for electron microscopic examination were taken during basal condition, prior and during occurrence of malignant arrhythmias. Cardiomyocyte alterations preceding occurrence of arrhythmias consisted of non-uniform sarcomere shortening, disruption of myofilaments and injury of mitochondria that most likely reflected cytosolic Ca2+ disturbances and Ca2+ overload. These disorders were linked with non-uniform pattern of neighboring cardiomyocytes and dissociation of adhesive junctions suggesting defects in cardiac cell-to-cell coupling. Our findings identified heterogeneously distributed high [Ca2+]i-induced subcellular injury of the cardiomyocytes and their junctions as a common feature prior occurrence of VT, VF or AF. In conclusion, there is a link between Ca2+-related disorders in contractility and coupling of the cardiomyocytes pointing out a novel paradigm implicated in development of severe arrhythmias., N. Tribulova, V. Knezl, B. Szeiffova Bacova, T. Egan Benova, C. Viczenczova, E. Gonçalvesova, J. Slezak., and Obsahuje bibliografii
V roce 2012 uběhlo 20 let od provedení první transjugulární intrahepatální portosystémové spojky (TIPS) ve Fakultní nemocnici v Hradci Králové., This is 20 years from the first transjugular portosystemic shunt (TIPS) performed in University Hospital, Hradec Králové in 2012., Krajina A., and Literatura
There is an overlap of carrier-mediated L-amino acid transport and apparent simple diffusion when measured in intestinal brush border membrane vesicles. Using L-threonine and L-glutamine as representative amino acids, this study was undertaken to estimate apparent simple diffusion of L-amino acids and to establish the effective dosage of HgCl2 for completely blocking carrier-mediated L-amino acid transport in porcine jejunal enterocyte brush border membrane vesicles. Jejunal mucosa was scraped from three pigs weighing 26 kg. Enterocyte brush border membrane vesicles, with an average enrichment of 24-fold in sucrase specific activity, were prepared by Mg2+-precipitation and differential centrifugation. In vitro uptake was measured by the fast filtration manual procedure. HgCl2 blocked the carrier-mediated initial transport of L-threonine and L-glutamine under Na+-gradient condition in a dose-dependent manner. At the minimal concentration of 0.165 mmol HgCl2 mg-1 protein, carrier-mediated L-threonine and L-glutamine transport was completely inhibited. The apparent L-threonine and L-glutamine diffusion was estimated to be 8.6±0.7 and 12.4±1.0 % of the total uptake at the substrate concentrations of 5 mM (L-threonine) and 50 mM (L-glutamine). Therefore, the treatment of porcine brush border membrane vesicles with a minimum of 0.165 mmol HgCl2 mg-1 protein completely blocks carrier-mediated L-amino acid transport and enables the direct estimation of apparent L-amino acid diffusion in enterocyte brush border membrane vesicles., M. Z. Fan, O. Adeola, E. K. Asem., and Obsahuje bibliografii
Aquaporins (AQPs) are water channel proteins responsible for water homeostasis and important for proper functioning of all body systems, including reproductive structures. This study was designed to determine their localization and quantitative changes in the pig ovary during different stages of the estrous cycle and early pregnancy. The expression of AQP 1, 5 and 9 proteins was determined by immunocytochemistry and Western blot analyses. AQP1 was found in the plasma membranes of capillary endothelium, AQP5 - in the plasma membranes of granulosa cells of developing follicles and flattened follicle cells of the primordial follicles, and AQP9 - in granulosa cells of the developing follicles. In the cyclic pigs, the expression of AQP1 and 5 proteins was the highest on Days 18-20, but did not change significantly between Days 2-4, 10-12 and 14-16 of the cycle. In pregnant pigs (Days 14-16 and 30-32), the expression of AQP1 and 5 did not change and was similar to that observed during Days 10-12 and 14-16. In turn, AQP9 expression did not change between all studied periods. In conclusion, studied AQP are localized in different cells populations, the endothelial and granulosa cells, and AQP1 and 5 seem to be crucial for follicular development in pigs., A. Skowronska, P. Mlotkowska, M. Eliszewski, S. Nielsen, M. T. Skowronski., and Obsahuje bibliografii
Huntingtonova nemoc (HN) je autozomálně dominantní neurodegenerativní onemocnění charakterizované poškozením volních a mimovolních pohybů, poruchami chování a zhoršením kognitivních funkcí. Společně s hlavními motorickými příznaky byly poruchy hlasu a řeči pozorovány u většiny pacientů s HN. Zvířecí prasečí model je často používán pro výzkum v preklinických studiích. I přes zjevné rozdíly v anatomii artikulačních orgánů mezi prasaty a lidmi lze očekávat stejné trendy u patofyziologických mechanizmů s ohledem na chrochtání i lidskou fonaci. Hlavním cílem této studie bylo proto navržení vhodného experimentu, který umožní získání dostatečně dlouhého záznamu chrochtání od co největšího počtu prasátek. Dalším cílem studie bylo zrealizovaní výsledné verze experimentu na celé databázi a vyhodnocení množství a kvality získaných nahrávek. Databáze použitá pro studii zahrnovala 17 HN transgenních miniprasátek a 16 zdravých sourozenců ze stejných vrhů. Testované varianty experimentu, provedené na části databáze zahrnující čtyři prasnice, byly rozděleni do čtyř podskupin: (a) pozitivní – krmení, (b) pozitivní – zvuková stimulace, (c) negativní – bránění v pohybu, (d) negativní – nepříjemné doteky. Hodnocení kvality získaných nahrávek bylo provedeno s pomocí audio softwaru, ve kterém bylo izolováno čisté prasečí chrochtání a všechny akustické artefakty vymazány. Nejlepších výsledků bylo dosaženo s použitím experimentu při kterém: (i) je záznamové zařízení upevněno na tělo prasátka, (ii) prasátko je ponecháno několik minut o samotě v místnosti, aby se uklidnilo a (iii) osoba vstoupí do místnosti a snaží se nabízet prasátku krmivo zatímco před ním couvá. V důsledku tohoto jednání prasátko následuje osobu s krmením, což je doprovázeno chrochtáním. Dostatečně dlouhé (20 chrochtnutí a více) a čisté nahrávky byly získány od 24 z 33 prasátek (73 %). Závěrem lze tedy říci, že experiment je proveditelný. Klíčová slova: Huntingtonova nemoc – chrochtání – transgenní model miniprasat – animální modely – poruchy hlasu a řeči Autoři deklarují, že v souvislosti s předmětem studie nemají žádné komerční zájmy. Redakční rada potvrzuje, že rukopis práce splnil ICMJE kritéria pro publikace zasílané do biomedicínských časopisů., Huntington’s disease (HD) is an autosomal-dominant neurodegenerative disorder characterized by the impairment of voluntary and involuntary movements, behavioral disorders and cognitive decline. Besides the main motor symptoms, voice and speech disorders have been documented in a large majority of patients with HD. The animal model of pigs is often used in preclinical studies. Although there are obvious differences in the anatomy of the articulation organs between pigs and humans, the same trends in pathophysiological mechanisms can be expected in both grunting and human phonation. The main aim of the study was therefore to design a suitable experiment that would allow for acquisition of a sufficiently long recording of grunting from as many pigs as possible. The second goal was to perform the final version of the experiment in all available pigs and to evaluate the amount and quality of the acquired recordings. The database consists of 17 HD transgenic minipigs and 16 healthy siblings. Tested variants of the experiment, performed on subgroup of four sows, were divided into four subgroups: (a) positive – feeding, (b) positive – sound stimulation, (c) negative – hindering in movement, (d) negative – unpleasant touch. The evaluation of the quality of the elicited recording was performed using audio software where pure pig grunting was selected and all acoustic artefacts deleted. The best results were reached using the experiment in which: (i) a recording device is put on the pig’s body, (ii) the pig is left alone for few minutes in the pen in order to calm down, and (iii) a person enters the room and tries to offer the pig food while walking backwards. As a result, the pig follows the person and grunts. Sufficiently long (20 single grunts or more) and clear recordings were received from 24 out of 33 pigs (73%). The realisation of the experiment is therefore possible. Key words: Huntington’s disease – grunting – transgenic pigs – animal models – voice and speech disorders The authors declare they have no potential conflicts of interest concerning drugs, products, or services used in the study. The Editorial Board declares that the manuscript met the ICMJE “uniform requirements” for biomedical papers., and T. Tykalova, J. Hlavnicka, M. Macakova, M. Baxa, R. Cmejla, J. Motlik, J. Klempir, J. Rusz
Kosterní pozůstatky zvířat z archeologických výzkumů středověkých lokalit tvoří soubory kostí a fragmentů. Na archeo-oste - - ologickém pracovišti Ústav anatomie, histologie a embryologie Fakulty veterinárního lékařství Veterinární a farmaceutické univerzity Brno jsou tyto soubory hodnoceny a výsledky porovnávány s dostupnými literárními prameny. Ve spolupráci s archeology jsou výsledky uváděny do souvislosti s ostatními nálezy. Naše práce se zaměřuje na hodnocení kostí a fragmentů, které tvoří kuchyňský odpad, tedy kosti se stopami kulinárního opracování. Pro jejich úspěšné určení je mnohdy významný i nález canalis nutricius na fragmentech diafýz dlouhých kostí. Rozdělení kostí dle „kvality“ masa na kategorie A, B a C umožnilo prokázat rozdíl ve složení masité stravy na panských sídlech a vesnick - ých usedlostech či v podhradí. Největší podíl v souborech tvoří často kosti skotu (až 56 %). Chov tohoto druhu byl oblíben nejen pro maso, ale i další možnosti využití. Naopak kosti malých přežvýkavců (ovce a kozy) byly v souborech zastoupeny maximálně do 17 % z důvodu omezené užitkovosti těchto zvířat. Rovněž kosti prasat tvořily menší podíl, zpravidla ne více než 10–30 %. Spotřeba vepřového masa odpovídá způsobu středověkého chovu prasat, zvířat s jednostranným využitím. Koňské kosti se stopami kuchyňského opracování tvořily jen malý podíl (nejčastěji do 4 %). Jen výjimečně byl jejich počet vyšší a to v souvislosti se specifickou situací ve studované lokalitě. Dělení kostí (nejčastěji sekáním) ukazuje na způsob řeznického a kuchyňského zpracování masa poražených zvířat. Všechny tyto výsledky jsou důležitým zdrojem informací o masité složce stravy středověké populace v různých sociálních prostředích, Animal skeletal remains from archaeological research of medieval localities create collections of bones and fragments. These col - lections are evaluated in archaeo-osteological detachment of Department of Anatomy, Histology and Embryology of University of Veterinary and Pharmaceutical Sciences Brno. Results are compared with accessible literary sources and in cooperation with archaeologists are correlated to other findings. This paper is focused on bones and fragments which create the kitchen waste. Successful determination can be notably sup - ported by finding of canalis nutricius on diaphysis of long bones. By the help of dividing bones into categories (A, B, C) according to “worth” of meat was facilitated documentation of differences in consum - mation of meat in aristocratic seats and rustic houses. The highest share was very often formed by cattle bones (up to 56 %). Breeding of this animal species was favourite not only for its meat but also for other possibilities of utilization. On contrary bones of small ruminants (sheep and goat) were presented only in smaller amount (up to 17 %) on the ground of their limited utility. Also participation of pig bones was lower (not more than 10–30 %). This rate of usage of pork meat is in accordance with the level of medieval breeding of pigs – animals with one-side usage. Only small parts of findings (up to 4 %) were formed by horse bones with trace of culinary processing. Higher number was very rare and always related to specific situation in the locality under study. Cutting of bones (mostly by chopping) shows the way of slaughter and culinary processing of meat. All these results are considered to be an important source of information about meaty component of food of medieval population in various social rank., Václav Páral, Martin Pyszko, and Literatura
This study explores the biological validation of markers of acute stress in pigs subjected to transportation for slaughter. The stress markers selected for monitoring were neopterin and cortisol. Their levels in pig serum were measured for two porcine stress syndrome genotypes, NN and Nn, after a 30-min transport to a slaughterhouse. Blood samples were withdrawn before transport (control group) and immediately after the animals' arrival (experimental group). The values of neopterin and cortisol measured before the transport were 5.60±1.65 nm ol/l and 273.54±66.17 nmol/l respectively. After the transfer, the concentration of cortisol rose significantly compared to the control (355.69±85.13 nmol/l, p<0.01). Neopterin concentrations in the serum (8.25±1.60 nmol/l) were also significantly higher (p<0.01) after transportation. The elevated concentrations of both analytes were found to be independent of the genotype. These results document the stimulation of the endocrine system and the immune system that develops in animals undergoing transportation for slaughter., K. Breineková, M. Svoboda, M. Smutná, L. Vorlová., and Obsahuje bibliografii a bibliografické odkazy